Dieselbe Lektion, mit bewegten Abbildungen.
Agar & Schrägagar — Vollständiges Protokoll
Das komplette Bankrezept, um Malzextrakt-Agar herzustellen und sowohl Petrischalen als auch Schrägagar-Röhrchen zu gießen. Die Mengen stammen von einem getesteten Heim-Setup und dienen als bewährter Ausgangspunkt, den du an deine eigene Ausrüstung anpasst.
Material
- Glasflasche für Medien, 250 ml (z. B. DURAN, mit Volumenmarkierung)
- Feinwaage (0,1 g Auflösung)
- Schnellkochtopf
- Trichter + Kaffeefilter (doppelt verwendet)
- Heller Trockenmalzextrakt (DME / Sprühmalz)
- Agar-Agar-Pulver
- Petrischalen aus Glas
- Reagenzgläser aus Glas mit Deckel
- Metall-Reagenzglasständer
- Aluminiumfolie
- Spiritusbrenner / Brenner
- Mikrowelle (zum erneuten Schmelzen des Agars)
1. Das Medium kochen (150 ml Malzagar)
- Wieg 15 g helles DME in die Flasche und füll mit Wasser bis zur 150-ml-Markierung auf. (= 100 g/L — dieselbe Würzestärke wie ein Hefestarter.)
- Koch die Flasche 15 Min. im Schnellkochtopf, um die Würze zu lösen und zu sterilisieren.
- Kühl die Flasche in einem kalten Wasserbad ab.
- Filtere durch doppelte Kaffeefilter und gieß die klare Flüssigkeit zurück in die Flasche. (Entfernt Proteintrübung, damit die Platten klar erstarren.)
- Gib 3,6 g Agar-Agar hinzu (≈ 2,4 %). Stell die Flasche zurück in den Schnellkochtopf.
- Koch 20 Min. im Schnellkochtopf, bis der Agar vollständig gelöst ist.
Der Schnellkochtopf muss echte Sterilisationstemperatur erreichen (~121 °C / 15 psi). Prüf mit Autoklavband, dass es vollständig die Farbe wechselt — verlass dich nicht nur auf die Zeit.
2. Die Glasgeräte sterilisieren
- Setz die Petrischalen in den Metallständer und koch sie ~15 Min. im Schnellkochtopf (niedrige Hitze, ~5 dl Wasser im Topf).
- Füll die Reagenzgläser so mit Medium, dass mindestens 1 cm bis zum Rand bleibt (damit nichts überläuft, wenn sie später ~20–35° geneigt werden). Schraub die Deckel locker auf.
Deckel dürfen nur locker aufgeschraubt sein — ein verschlossenes Röhrchen baut Druck auf und das Glas kann im Topf springen.
3. Platten gießen und Schrägagar anlegen
- Schmilz die Agarflasche bei Bedarf in der Mikrowelle wieder auf, dabei ab und zu vorsichtig schwenken.
- Lass die Flasche abkühlen, bis du sie an die Wange halten kannst, ohne dich zu verbrennen (~50–55 °C). Heißer verbrennt dich; kälter erstarrt, bevor du gegossen hast.
- Arbeite neben einer Spiritusflamme (die aufsteigende sterile Luft hält Staub fern). Gieß ~10 ml in jede Petrischale. Lass sie mit leicht geöffnetem Deckel erstarren, bis das Kondenswasser verschwunden ist.
- Für Schrägagar: nach dem Kochen die Deckel festziehen und die Röhrchen in einem Winkel von 20–35° lagern, bis der Agar als schräge Fläche erstarrt.
- Bewahr fertige Platten und Schrägröhrchen kopfüber im Kühlschrank auf.
Der Agar kocht in der Mikrowelle sehr leicht über — in kurzen Intervallen erhitzen und beobachten.
Die schräge Fläche eines Schrägröhrchens bietet mehr Wuchsfläche zum Ausstreichen im engen Röhrchen.
Erneuere den Schrägagar alle drei Monate. Die Hefe lebt im Kühlschrank langsam weiter, und jenseits von ~3 Monaten lässt sich genetische Drift nicht ausschließen. Schreib das Datum auf das Röhrchen — und frier den Stamm in Glycerin ein, wenn du ihn über Jahre behalten willst.