Samma lektion, med figurerna i rörelse.
Från en enskild koloni (CFU) — Slant/platta till pitchklar kultur (20 L)
Bygger en hel kultur från en enskild koloni (1 CFU) — en isolerad koloni på en petriskål eller slant, ungefär 1–10 miljoner celler. Eftersom det är ~10–100× färre än en utstruken slant lägger vi till ett litet uppväckningssteg först; sen är det samma väg som slant-protokollet. Mål: ~450–500 miljarder celler för en stark 20-liters vört (>1.075 SG). Anpassa mängderna efter din egen utrustning.
Material
- E-kolv 1000 ml
- E-kolv 5000 ml
- Saniterad behållare med lock (t.ex. glasburk) — för att tillfälligt förvara kulturen mellan steg
- Kokplatta
- Magnetomrörare + magnetloppa
- Ljust torrt maltextrakt (DME / spraymalt)
- Jästnäring
- Aluminiumfolie
- Kranvatten
- Hushållsvåg (helst 0,1 g upplösning för näringen)
- Termometer
- Ytdesinfektion (t.ex. StarSan) för ytor, flaskmynningar och folie
- Inokuleringsloop (steril engångs, eller metall som flamberas)
- Spritlampa / brännare (för att flambera loopen)
- Sterilt tomt provrör med lock (för uppväckningssteget)
- Petriskål eller slant med en väl isolerad koloni
Innan du börjar — genomgående regler
- Sanera alla ytor, flaskmynningar och folie innan varje moment.
- Lägg magnetloppan i kolven före kok, så kokas den ren samtidigt.
- Kyl alltid vörten till ~20 °C (kontrollera med termometer) innan jäst tillsätts — för varm vört skadar jästen.
- Kör varje vätskesteg på omröraren tills krausen stigit och fallit (~24–48 h) innan du går vidare.
Kokande vört ger brännskador. Täck aldrig lufttätt — ånga måste kunna komma ut, annars kan trycket spränga glaset.
Steg 1 — Plocka kolonin (~15 ml, provrör)
- Väg upp ~1,5 g DME i ett provrör och fyll vatten till 15 ml (≈ 1.036 SG). Löst lock, koka, kyl sedan till ~20 °C.
- Flambera inokuleringsloopen tills den glöder, låt svalna ~5 sek, plocka sedan EN väl isolerad koloni från plattan/slanten.
- Snurra loopen i vörten så cellerna släpper. Löst lock.
- Håll ~20 °C och skaka för hand några ggr/dag i 1–2 dygn tills det grumlas. (Det här lilla steget görs statiskt — 15 ml är för grunt för att loppan ska koppla.) (~1–10 miljoner → ~0,1–0,3 miljarder celler.)
Flambera loopen till glödande och låt svalna ~5 sek innan du rör kolonin — för varmt dödar cellerna du plockar. Plocka bara EN isolerad koloni så kulturen förblir ren.
Steg 2 — Väck upp (~150 ml)
- Väg upp 15 g DME i E-kolv 1000 ml och fyll vatten till 150 ml-markeringen (≈ 1.036 SG). Lite kokar bort, och det gör inget. Lägg i loppan och täck löst med saniterad folie.
- Koka upp och koka i 15–20 min.
- Kyl i kallt vattenbad till ~20 °C och ställ på omröraren.
- Häll hela provrörskulturen (steg 1) i kolven och låt gå 24–48 h. (~3–5 miljarder celler.)
Steg 3 — Bygg upp (~500 ml)
- Häll steg 2-kulturen till den saniterade behållaren (lock på) och rengör E-kolv 1000 ml.
- Väg upp 50 g DME i kolven och fyll vatten till 500 ml (≈ 1.036 SG). Lägg i loppan och täck med folie.
- Koka 15–20 min, kyl till ~20 °C och ställ på omröraren.
- Häll hela steg 2-kulturen i kolven och låt gå 24–48 h. (~40–50 miljarder celler.)
Har du bråttom? Du kan hoppa över det här steget och gå direkt från 150 ml till slutkulturen — men då når du inte cellmålet. 150 ml håller ~4 miljarder celler, och slutsteget skulle då behöva mångfaldiga dem 40–50×, där de övriga stegen går ~10×.
Steg 4 — Slutkultur (~3 L)
- Väg upp 300 g DME i den rena E-kolv 5000 ml, fyll vatten till 3000 ml och tillsätt 0,3 g jästnäring (≈ 1.036 SG). Lägg i loppan och täck med folie.
- Koka 15–20 min, kyl till ~20 °C och ställ på omröraren.
- Häll hela steg 3-kulturen (från 1000 ml-kolven) direkt i 5000 ml-kolven och låt jäsa ut 24–48 h. (~450–500 miljarder celler.)
Här behövs ingen mellanbehållare — 5000 ml-kolven är fri, så du gör vörten direkt i den och häller föregående kultur rakt över. Ett kontaminationssteg mindre.
Före pitch
- Kallkrascha slutkulturen i kylen 12–24 h så jästen sjunker till botten.
- Häll av det mesta av den utjästa vörten och pitcha slurryn.
- Gissa inte på slutantalet — räkna det → Cellantalen ovan är uppskattningar. Har du räknekammare säger Uppmätt-läget exakt hur många mL slurry den här satsen ska ha.
- Räkna med ~5–7 dagar totalt (~2 dygn/steg + kallkrasch).
Att pitcha hela slutkulturen betyder ~3 L gammal förkultursöl i din 20 L-batch (~15 %) — dekanterar du slipper du det och behåller ölets renhet.
Antaganden & cellantal
- Startpunkt: en enskild koloni innehåller ungefär ~1–10 miljoner viabla celler (varierar med kolonins storlek och ålder).
- Vörtstyrka ~1.036 SG i alla steg (100 g DME/L).
- ~10–30× tillväxt per steg, sluttäthet ~100–150 miljarder/L (realistiskt för omrörare).
- Pitchkalkylatorn räknar en förkultur från ett paket till försiktiga 100 miljarder/L – ett pakets viabilitet är osäker. Det här protokollets högre tal kommer från en färsk kultur som byggts upp steg för steg.
- Efter steg 1: ~0,1–0,3 mrd · steg 2: ~3–5 mrd · steg 3: ~40–50 mrd · steg 4: ~450–500 mrd celler.
- Målet ~450–500 mrd passar en lager eller stark ale (>1.075 SG); en normal ale klarar sig på mindre.