Samma lektion, med figurerna i rörelse.
Agar & Slants — Fullständigt protokoll
Hela bänkreceptet för att göra maltextrakt-agar och gjuta både petriplattor och lutande provrörs-slants. Mängderna kommer från en testad hemmauppställning och fungerar som en beprövad utgångspunkt att anpassa efter din egen utrustning.
Material
- Glasflaska för medium, 250 ml (t.ex. DURAN, med volymmarkering)
- Precisionsvåg (0,1 g upplösning)
- Tryckkokare
- Tratt + kaffefilter (används dubbla)
- Ljust torrt maltextrakt (DME / spraymalt)
- Agar-agar-pulver
- Petriskålar av glas
- Provrör av glas med lock
- Provrörsställ av metall
- Aluminiumfolie
- Spritlampa / brännare
- Mikrovågsugn (för att smälta om agarn)
1. Koka mediet (150 ml maltagar)
- Väg upp 15 g ljust DME i flaskan och fyll på vatten till 150 ml-markeringen. (= 100 g/L — samma vörtstyrka som en förkultur.)
- Tryckkoka flaskan i 15 min för att lösa och sterilisera vörten.
- Kyl flaskan i ett kallt vattenbad.
- Filtrera genom dubbla kaffefilter och häll tillbaka den klara vätskan i flaskan. (Tar bort proteinslam så plattorna stelnar klara.)
- Tillsätt 3,6 g agar-agar (≈ 2,4 %). Ställ tillbaka flaskan i tryckkokaren.
- Tryckkoka i 20 min tills agarn är helt löst.
Tryckkokaren måste nå riktig steriliseringstemp (~121 °C / 15 psi). Verifiera med autoklavtejp att den slår om helt i färg — lita inte bara på tiden.
2. Sterilisera glaset
- Tryck fast petriskålarna i provrörsstället och tryckkoka dem ~15 min (låg effekt, ~5 dl vatten i kokaren).
- Fyll provrören med medium så att det är minst 1 cm kvar till kanten (så inget rinner över när de sen lutas ~20–35°). Skruva locken löst.
Locken får bara vara löst påskruvade — ett förslutet rör bygger upp tryck och glaset kan spricka i kokaren.
3. Gjut plattor & luta slants
- Smält om agarflaskan i mikron om den stelnat, och snurra försiktigt då och då.
- Låt flaskan svalna tills du kan hålla den mot kinden utan att bränna dig (~50–55 °C). Varmare bränner dig; kallare stelnar innan du hunnit hälla.
- Arbeta bredvid en spritlåga (den stigande sterila luften håller damm borta). Häll ~10 ml i varje petriskål. Låt dem stelna med locket på glänt tills kondensen försvunnit.
- För slants: efter kokning, dra åt locken och luta rören i 20–35° vinkel tills agarn stelnat i en sluttande yta.
- Förvara färdiga plattor och slants upp-och-ner i kylen.
Agarn kokar väldigt lätt över i mikron — värm i korta intervaller och håll koll.
Slantens sluttande yta ger mer växtarea för strykning inne i det smala röret.
Odla om slanten var tredje månad. Jästen lever vidare långsamt i kylan, och bortom ~3 månader kan genetisk drift inte uteslutas. Skriv datumet på röret — och frys in stammen i glycerol om du vill spara den i år.