Dieselbe Lektion, mit bewegten Abbildungen.
Aus einer einzelnen Kolonie (KBE) — Schrägagar/Platte zur anstellfertigen Kultur (20 L)
Baut eine vollständige Kultur aus einer einzelnen Kolonie (1 CFU) auf — einer isolierten Kolonie auf einer Petriplatte oder einem Schrägagar, etwa 1–10 Millionen Zellen. Da das ~10–100× weniger ist als ein Schrägausstrich, fügen wir vorne einen kleinen Weckschritt hinzu; danach ist es derselbe Weg wie beim Schrägagar-Protokoll. Ziel: ~450–500 Milliarden Zellen für eine starke 20-Liter-Würze (>1.075 SG). Pass die Mengen an deine eigene Ausrüstung an.
Material
- Erlenmeyerkolben, 1000 ml
- Erlenmeyerkolben, 5000 ml
- Desinfizierter Behälter mit Deckel (z. B. Einmachglas) — um die Kultur zwischen den Schritten aufzubewahren
- Kochplatte
- Magnetrührer + Magnetfisch
- Heller Trockenmalzextrakt (DME / Sprühmalz)
- Hefenährstoff
- Aluminiumfolie
- Leitungswasser
- Küchenwaage (idealerweise 0,1 g Auflösung für den Nährstoff)
- Thermometer
- Desinfektionsmittel (z. B. StarSan) für Flächen, Kolbenhälse und Folie
- Impföse (steril, Einweg, oder Metall zum Abflammen)
- Spiritusbrenner / Brenner (zum Abflammen der Öse)
- Steriles leeres Röhrchen mit Deckel (für den Weckschritt)
- Petriplatte oder Schrägagar mit einer gut isolierten Kolonie
Bevor du beginnst — durchgehende Regeln
- Desinfizier vor jedem Schritt alle Flächen, Kolbenhälse und Folie.
- Gib den Magnetfisch vor dem Kochen in den Kolben, so wird er gleich mit ausgekocht.
- Kühl die Würze immer auf ~20 °C ab (mit dem Thermometer prüfen), bevor du Hefe zugibst — zu heiße Würze schädigt sie.
- Lass jeden Flüssigschritt auf dem Rührer laufen, bis die Kräusen gestiegen und wieder gefallen sind (~24–48 h), bevor du weitermachst.
Kochende Würze verursacht Verbrennungen. Niemals luftdicht abdecken — der Dampf muss entweichen können, sonst kann der Druck das Glas sprengen.
Schritt 1 — Kolonie picken (~15 ml, Röhrchen)
- Wieg ~1,5 g DME in ein Röhrchen und füll mit Wasser auf 15 ml auf (≈ 1.036 SG). Locker verschließen, kochen, dann auf ~20 °C abkühlen.
- Flamme die Impföse ab, bis sie glüht, lass sie ~5 s abkühlen und pick dann EINE gut isolierte Kolonie von der Platte/dem Schrägagar.
- Schwenk die Öse in der Würze, um die Zellen abzulösen. Locker verschließen.
- Bei ~20 °C halten und einige Male am Tag von Hand schwenken, 1–2 Tage, bis es trüb wird. (Dieser winzige Schritt läuft statisch — 15 ml sind zu flach, als dass der Magnetfisch koppeln könnte.) (~1–10 Millionen → ~0,1–0,3 Milliarden Zellen.)
Öse bis zum Glühen abflammen und ~5 s abkühlen lassen, bevor du die Kolonie berührst — zu heiß tötet die Zellen, die du pickst. Nur EINE isolierte Kolonie picken, damit die Kultur rein bleibt.
Schritt 2 — Aufwecken (~150 ml)
- Wieg 15 g DME in den 1000-ml-Kolben und füll mit Wasser bis zur 150-ml-Marke auf (≈ 1.036 SG). Ein wenig verkocht, das macht nichts. Gib den Magnetfisch hinein und deck locker mit desinfizierter Folie ab.
- Aufkochen und 15–20 min kochen.
- Im kalten Wasserbad auf ~20 °C abkühlen und auf den Rührer stellen.
- Gieß die gesamte Röhrchen-Kultur (Schritt 1) in den Kolben und lass 24–48 h laufen. (~3–5 Milliarden Zellen.)
Schritt 3 — Aufbauen (~500 ml)
- Gieß die Schritt-2-Kultur in den desinfizierten Behälter (Deckel drauf) und reinig den 1000-ml-Kolben.
- Wieg 50 g DME in den Kolben und füll mit Wasser auf 500 ml auf (≈ 1.036 SG). Magnetfisch hinein, mit Folie abdecken.
- 15–20 min kochen, auf ~20 °C abkühlen und auf den Rührer stellen.
- Gieß die gesamte Schritt-2-Kultur in den Kolben und lass 24–48 h laufen. (~40–50 Milliarden Zellen.)
In Eile? Du kannst diesen Schritt überspringen und direkt von 150 ml zur Endkultur gehen — aber dann erreichst du die Zellzahl nicht. 150 ml enthalten ~4 Milliarden Zellen, und der letzte Schritt müsste sie um das 40- bis 50-Fache vermehren, wo die übrigen Schritte etwa das 10-Fache schaffen.
Schritt 4 — Endkultur (~3 L)
- Wieg 300 g DME in den sauberen 5000-ml-Kolben, füll mit Wasser auf 3000 ml auf und gib 0,3 g Hefenährstoff hinzu (≈ 1.036 SG). Magnetfisch hinein, mit Folie abdecken.
- 15–20 min kochen, auf ~20 °C abkühlen und auf den Rührer stellen.
- Gieß die gesamte Schritt-3-Kultur (aus dem 1000-ml-Kolben) direkt in den 5000-ml-Kolben und lass sie 24–48 h ausgären. (~450–500 Milliarden Zellen.)
Hier ist kein Zwischenbehälter nötig — der 5000-ml-Kolben ist frei, also mach die Würze direkt darin und gießen die vorherige Kultur direkt hinüber. Ein Kontaminationsschritt weniger.
Vor dem Anstellen
- Stell die fertige Kultur 12–24 h kalt (Kühlschrank), damit sich die Hefe am Boden absetzt.
- Gieß den größten Teil der ausgegorenen Würze ab und stell nur den Bodensatz an.
- Die Endzahl nicht schätzen — messen → Die Zellzahlen oben sind Schätzungen. Mit einer Zählkammer sagt dir der Modus „Gemessen“ genau, wie viele mL dieses Bodensatzes du anstellen sollst.
- Rechne mit ~5–7 Tagen insgesamt (~2 Tage pro Schritt + Kaltstellen).
Die ganze Kultur anzustellen bedeutet ~3 L altes Starterbier in deinem 20-L-Sud (~15 %) — durch Abgießen vermeidest du das und hältst das Bier sauber.
Annahmen & Zellzahlen
- Ausgangspunkt: eine einzelne Kolonie enthält etwa ~1–10 Millionen lebensfähige Zellen (schwankt mit Koloniegröße und -alter).
- Würzestärke ~1.036 SG in jedem Schritt (100 g DME/L).
- ~10–30× Wachstum pro Schritt, Enddichte ~100–150 Milliarden/L (realistisch für einen Magnetrührer).
- Der Anstellrechner rechnet einen Starter aus einer Packung vorsichtig mit 100 Milliarden/L – die Viabilität einer Packung ist unsicher. Die höhere Zahl dieses Protokolls stammt von einer frischen, Schritt für Schritt aufgebauten Kultur.
- Nach Schritt 1: ~0,1–0,3 Mrd. · Schritt 2: ~3–5 Mrd. · Schritt 3: ~40–50 Mrd. · Schritt 4: ~450–500 Mrd. Zellen.
- Das Ziel ~450–500 Mrd. passt zu einem Lager oder starken Ale (>1.075 SG); ein normales Ale braucht weniger.